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鴻朗科技帶您了解小龍蝦等水產(chǎn)品中硝基呋喃類藥物的檢測
更新時間:2018-04-13   點擊次數(shù):2293次

 

近年來,水產(chǎn)品硝基呋喃類藥物殘留超標事件屢屢發(fā)生,嚴重威脅著人民身體健康和我國水產(chǎn)品出口貿(mào)易。鑒于硝基呋喃類藥物殘留的嚴重危害,我國農(nóng)業(yè)部于2002年4月發(fā)布193號公告,公布了《食品動物禁用獸藥及其他化合物清單》,規(guī)定硝基呋喃類抗生素在所有食品動物中禁止使用,2003年又將水產(chǎn)品硝基呋喃代謝物納入殘留監(jiān)控計劃。

目前檢測水產(chǎn)品中的硝基呋喃類化合物,可參考的國標是農(nóng)業(yè)部783號公告-1-2006水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法。該方法將樣品肌肉組織中殘留的硝基呋喃類蛋白結(jié)合代謝物在酸性條件下水解,用2-硝基苯甲醛衍生化,然后經(jīng)乙酸乙酯液液萃取凈化后,LC-MS法檢測。該方法使用液液萃取提取,操作復雜耗時長,重現(xiàn)性差,回收率不穩(wěn)定。

 

本文采用HyperSep Retain PEP SPE小柱進行樣品前處理,操作簡單、省時、省力,能夠得到較高和穩(wěn)定的回收率。Retain PEP 前處理小柱對于4種硝基呋喃類藥物可實現(xiàn)0.05μg/kg的LOQ,遠遠高于國標方法的0.5μg/kg?;厥章试?9-110%之間,RSD在3-22%之間。使用Hypersil GOLD C18色譜柱,在LC/MS 上具有出色的峰形和分辨率。

 

樣品提取

2g 樣品中加入4mL 水,0.5mL 0.5M HCL, 加入200μL新鮮配制的50mM 鄰硝基甲苯的DMSO 衍生液,渦勻1min,在37℃水浴中避光衍生過夜(14-16 小時)。衍生后加入5mL 0.1M K2HPO4,用0.4 M NaOH調(diào)整PH到7.0-7.5,混勻后取上清液。

 

SPE操作步驟

60mg 3mL HyperSep Retain PEP 固相萃取柱( 貨號:60107-203):

活化

3mL 甲醇,3mL 水

上樣

樣品,1-2mL/min

清洗

5mL 水,2mL 30% 甲醇的水溶液

洗脫

5mL 乙酸乙酯

 

色譜條件:

色譜柱 Thermo Scientific Hypersil GOLD C18,5μm,100×2.1mm

貨號  25005-102130

流動相

A: 0.5mM 醋酸銨水溶液      

B: 甲醇

梯度

進樣量 20μL

流速 250μL/min

 

 

質(zhì)譜條件:

電噴霧電離源(ESI),正離子模式

選擇反應監(jiān)控(SRM)掃描模式

噴霧電壓 5000V

離子傳輸管度 300℃

 

回收率:4 種硝基呋喃類藥物回收率在79%-110%, RSD 在3 到22%(n=3)。

 

LOQ:AHD,AO,SEM,AMO 的LOQ 0.05μg/kg。

 

 

結(jié)論

Retain PEP 前處理小柱對于4種硝基呋喃類藥物可實現(xiàn)0.05μg/kg的LOQ,回收率在79-110%之間,RSD在3-22%之間,*農(nóng)業(yè)部783號公告-1-2006水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法方法要求。

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