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Waters液相色譜柱使用緩沖鹽操作方法了解下
更新時(shí)間:2020-04-27   點(diǎn)擊次數(shù):2777次
  Waters液相色譜柱的使用壽命,除了與所分析的樣品和流動(dòng)相及使用頻率有關(guān)系外,主要的是與日常的維護(hù)密切相關(guān)。為延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命,維護(hù)您的利益,請(qǐng)仔細(xì)閱讀此部分。
 
  色譜柱的使用壽命主要是分為柱效和柱壓兩個(gè)指標(biāo)來(lái)衡量,如果一支色譜柱柱效太低或柱壓太高,通常被認(rèn)為該色譜柱已經(jīng)結(jié)束。因此,延長(zhǎng)色譜柱使用壽命的關(guān)鍵是,消除引起柱效下降和柱壓升高的因素。
 
  Waters液相色譜柱是一種用于液體色譜分析儀器。所以在選擇色譜柱之前,多了解一下自己的樣品和雜質(zhì),它們的類(lèi)型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量等。
 
  1、樣品是極性和弱酸性的;C18可選擇在100%酸性水溶液條件下進(jìn)行檢測(cè),即選擇一種能承載100%純水并能很好保留極性化合物的色譜柱。
 
  2、如果樣品的極性太強(qiáng)或酸度太強(qiáng);可以選擇CN、NH2或硅膠柱、HILIC(親水色譜),也可以使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對(duì)試劑平衡時(shí)間長(zhǎng),需要相對(duì)精確的流動(dòng)相ph值,否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn),另外離子對(duì)試劑很難洗掉,基本上離子對(duì)色譜柱不能用于其他實(shí)驗(yàn))
 
  正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為一句話:使用前要過(guò)濾,使用后要沖洗。具體方法如下:
 
  1、等度條件:使用緩沖鹽前和使用后需用過(guò)渡流動(dòng)相以1。0ml/min流速?zèng)_洗60min;使用后去除緩沖鹽的另一個(gè)方法是用過(guò)渡流動(dòng)相以0。2ml/min流速?zèng)_洗色譜柱過(guò)夜。
 
  2、梯度條件:用含有緩沖鹽的流動(dòng)相跑梯度之前,用與初始流動(dòng)相組成相同的過(guò)渡流動(dòng)相以1。0ml/min流速?zèng)_洗60min,再用該過(guò)渡流動(dòng)相以1。0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動(dòng)相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩,以避免梯度過(guò)程中緩沖鹽析出。

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