Waters液相色譜柱采用可靠的高質(zhì)量制造工藝,可確?,F(xiàn)在開發(fā)的方法在將來也能提供相同的可重現(xiàn)結(jié)果。色譜是-種分離分析手段,分離是核心,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。
色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70Kg/cm2時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。
選擇Waters液相色譜柱時應(yīng)考慮不同色譜柱參數(shù)的影響,以下內(nèi)容對色譜柱的參數(shù)進(jìn)行分析:
色譜柱尺寸:
1、較長的色譜柱組分保留較強(qiáng),運(yùn)行時間較長,柱效更高,分離度效果更好。在實(shí)際工作中應(yīng)綜合衡量運(yùn)行時間和柱效,選擇長度適宜的色譜柱。例如含量測定、溶出檢測對于分離的要求較低,可選用較短的色譜柱,減少運(yùn)行時間;有關(guān)物質(zhì)一般選擇較長的色譜柱,提高分離效果。
2、內(nèi)徑小的色譜柱靈敏度較高,峰型更窄,但是載樣量較小。如果載樣量滿足要求,需要更高更尖銳的峰提高靈敏度,可以選擇更小內(nèi)徑。但是如果進(jìn)樣量超過了柱載樣量,色譜峰將極大變寬。所以應(yīng)在靈敏度和載樣量之間綜合衡量。
3、粒徑小的色譜柱分離度較好,色譜柱壓力更大。如果5μm粒徑的色譜柱分離度稍有不足,則同型號3μm色譜柱的分離度一般會提供令人滿意的選擇性。
如果選擇較小尺寸的色譜柱,應(yīng)衡量柱外死體積對柱效的影響,柱外死體積包括連接管線、進(jìn)樣體積、色譜柱接頭與色譜柱連接處的空隙等。所以一般超高效液相使用的色譜柱不適用于常規(guī)液相儀。小規(guī)格色譜柱最好使用同一品牌的儀器,減少連接處空隙引入的死體積。題外話:島津、安捷倫、waters之間儀器管線接頭和色譜柱不匹配,儀器和色譜柱品牌不一致必然引入較大連接空隙,應(yīng)注意這方面的影響。